تعیین سویه های لاکتوباسیلوس با خاصیت پروبیوتیکی، مولد لینولئیک اسید مزدوج (cla) توسط ژن لینولئیک اسید ایزومراز در شرایط آزمایشگاهی

امروزه رژیم غذایی نامناسب تاثیرات بسیار نامطلوبی را بر زندگی انسان گذاشته است. از جمله این اختلالات می توان به چاقی و سرطان اشاره کرد که به عنوان معضل قرن حاضر از آن یاد می شود. مواد غذایی حاوی پروبیوتیک ها از نوع غذاهای فراسودمند می باشند. پروبیوتیک ها علاوه بر کمک به گوارش مولکول های پیچیده، ترکیباتی مانند ویتامین ها و آنتی بیوتیک های مختلف را تولید می کنند که برای بدن مفید می باشند. لینولئیک اسید مزدوج، ایزومر فضایی و هندسی لینولئیک اسید، امروزه به علت خواص ویژه از جمله خاصیت ضد سرطانی، ضد التهاب و ضد چاقی با دخالت در متابولیسم چربی ها، تقویت کننده سامانه ایمنی امروزه بسیار مورد توجه قرار گرفته است. از این رو در این مطالعه به بررسی تولید لینولئیک اسید مزدوج توسط سویه های پروبیوتیکی پرداخته شد. در ابتدا، اثر روغن آفتابگردان و لینولئیک اسید بر رشد سه سویه استاندارد پروبیوتیک مطالعه شد. توانایی 5 پروبیوتیک مورد نظر به دو شکل سلول های در حال رشد و سلول های در حال استراحت برای تولید لینولئیک اسید مزدوج مورد بررسی قرار گرفت. سپس تاثیر تیمار سلول های در حال رشد با لینولئیک اسید و استفاده از توده سلولی به دست آمده از آن ها برای تولید لینولئیک اسید مزدوج ، نقش آنزیم لیپاز در حضور منابع تری گلیسریدی لینولئیک اسید ، تاثیر غلظت و نوع سوبسترا در لینولئیک اسید مزدوج تولید شده نیز مورد بررسی واقع شد. با استفاده از طراحی آزمایش به روش تاگوچی بهینه سازی فاکتورهای دمای گرماگذاری، ph بافر فسفات پتاسیم m1/0، میزان تلقیح توده سلولی مرطوب در محیط تولید، میزان توئین 80 به عنوان امولسیفایر، غلظت سوبسترا، زمان گرماگذاری و تاثیر اکسیژن بر تولید ایزومرهای لینولئیک اسید مزدوج انجام شد. بیشترین میزان تولید ایزومرهای لینولئیک اسید مزدوج با استفاده از 12% توده سلولی مرطوب lactobacillus plantarum atcc 8014 از 008/0 روغن آفتابگردان، در بافر فسفات پتاسیم m1/0 با 5/6 ph تحت شرایط عدم حضور اکسیژن، در دمای گرماگذاری c°37 به مدت 72 ساعت بوده است. همچنین با استفاده از توالی گزارش شده در genbank، طراحی پرایمر برای ژن لینولئات ایزومراز سویه lactobacillus plantarum atcc 8014 صورت گرفت و با انجام pcr میزان شباهت میان توالی ژن لینولئات ایزومراز این سویه با ژن لینولئات ایزومراز سایر سویه های مولد لینولئیک اسید مزدوج مورد بررسی، مشخص گردید.